电泳时要注意些什么
在进行电泳时,应注意以下事项:
极性连接 :确保电泳槽的两个电极与电泳仪的直流输出端正确连接,且极性不要接反。电源设置:
将电泳仪电源开关调至关的位置,电压旋钮转到最小,然后选择稳压稳流方式及电压电流范围。接通电源后,缓缓旋转电压调节钮直到达到所需电压,并设定电泳终止时间。
安全操作
电泳仪通电后,禁止人体接触电极、电泳物及其他可能带电部分,也不得进入电泳槽内取放物品,必要时应先断电以防触电。
仪器必须有良好的接地端,以防漏电。
不要随意增加或拨除输出导线插头,以免发生短路现象,虽然仪器内部有保险丝,但短路仍可能导致仪器损坏。
避免超载:
在总电流不超过仪器额定电流的情况下,可以多槽关联使用,但要注意不能超载,以免影响仪器寿命。
异常处理:
使用过程中如发现较大噪音、放电或异常气味等异常现象,应立即切断电源并进行检修,避免发生意外事故。
维护与保养:
定期检查电泳槽、循环管道及泵内的杂质离子,确保电泳液的稳定性和涂层质量。电泳后应及时清洗电泳槽和阳极罩,防止对环境造成污染。
样品处理:
根据实验需求,对样品进行必要的预处理,如使用酶切酶、核酸酶等进行处理,以获得所需的分离效果。确保样品在电泳前无油污、锈迹等杂质,以保证涂层能良好附着。
电泳液控制:
控制电泳液的温度在26~30℃范围内,确保高纯水的电导率小于30us/cm,定期检查阳极液的电导率并及时更换。
操作规范
正确连接电源,设置电压、电流、时间等参数,调整电压时应缓慢旋转电压调节钮。
在电泳期间,严禁用手触摸槽液、槽沿和挂钩,防止触电事故。
如有两人操作,负责开开关的人必须确认另一人的手已从挂钩上拿开后再按下开关。
其他注意事项
凝胶正负极不要弄反,控制电压及电泳时间,防止条带跑出。
点样时,点样量不要溢出点样孔,注意枪头不要捅破点样孔的凝胶。
电泳过程中需要使用marker做对照,以验证目的片段的大小。
电泳前除油污、水洗一定要彻底,防止出现缩孔或影响电泳槽液电导率。
通过遵循以上注意事项,可以有效确保电泳过程的顺利进行,并保障实验的安全性和结果的准确性。