蛋白电泳为什么不凝固

蛋白电泳不凝固的原因可能有以下几点：

过硫酸胺失效：

过硫酸胺（APS）在电泳中作为氧化剂，如果失效，会导致电泳无法正常进行。过硫酸胺应现配现用，并且如果跑胶频率高，使用后应放在4℃保存，一周后必须重新配制。

TEMED（四甲基乙二胺）用量不足：

TEMED是电泳中常用的加速剂，能够加速凝胶的聚合过程。如果TEMED用量不足，可能会导致凝胶聚合不完全，从而影响电泳的进行和结果。

凝胶配方问题：

蛋白电泳通常使用琼脂糖凝胶或聚丙酰胺凝胶，如果凝胶配方不正确，比如琼脂糖浓度过低或聚丙酰胺浓度不当，也可能导致电泳不凝固。

实验操作问题：

在配制凝胶、加样、电泳过程中，如果操作不当，如凝胶未充分聚合、加样量过多或过少、电泳时间不足等，也可能影响电泳的结果。

设备故障：

电泳仪的电源、加热装置、凝胶染色仪等如果出现故障，也可能导致电泳无法正常进行。

为了解决蛋白电泳不凝固的问题，可以尝试以下方法：

检查过硫酸胺的有效性：

确保过硫酸胺是现配现用的，并且妥善保存。

调整TEMED用量：

根据实验需要适当增加TEMED的用量，通常从5μl提高到8μl是可行的。

优化凝胶配方：

根据实验需求选择合适的琼脂糖浓度和聚丙酰胺浓度，并确保凝胶配制正确。

规范实验操作：

严格按照实验步骤进行操作，确保凝胶聚合充分，加样量适宜，电泳时间充足。

检查设备状态：

确保电泳仪及相关设备处于良好工作状态，及时排除故障。

通过以上方法，可以有效解决蛋白电泳不凝固的问题，提高实验的成功率和准确性。